형광인비보이미징시스템
just as it is . . .
Applications
Tumor Imaging
GFP stable cell line 을 이용하여 tumorization을 확인할 수 있습니다. 만들어진 GFP stable cell line은 FOBI 영상을 통해서 확인할 수 있습니다. GFP cell을 피하 등의 조직에 주사하고 cell이 증식하는 과정을 형광영상을 얻을 수 있습니다. 이후 다른 조직으로의 전이과정도 영상을 얻을 수 있고, 그 정도를 정량 하여 비교할 수 있습니다.
시간이 지남에 따라서 형광의 세기는 달라지고, 이에 따른 카메라 노출 시간은 달라질 수 있습니다. NEOimage 분석프로그램을 통해서 노출시간과 gain과 같은 영상조건에 따른 변화를 고려하여 비교할 수 있기 때문에, 다른 시간 다른 샘플의 결과도 비교 분석할 수 있습니다.
Cell Tracking
여러 가지 목적으로 기능이 향상된 줄기세포 또는 면역세포를 동물 내에서 확인하여 생존여부 및 위치를 확인할 수 있습니다. 줄기세포 및 면역세포는 그 특성상 형광유전자를 넣어서 분석하는 것이 어렵습니다. 다양한 방법을 통해서 세포를 형광시약으로 염색 할 수 있습니다.
형광시약으로 염색된 줄기세포 및 면역세포는 정맥주사, 복강주사 및 피하주사 등 여러가지 방법으로 동물에 넣을 수 있습니다. 이 세포는 FOBI 이미징을 통해서 위치를 확인할 수 있습니다. 또한 정량 분석을 통해서 얼마나 살아있는지도 확인 가능합니다.
Plant
GFP로 표지된 식물 잎의 영상을 얻을 수 있습니다. 식물의 잎은 Chlorophyll의 강력한 자가형광으로 인해서 영상을 얻기 어렵습니다. Chlorophyll의 자가형광을 제거할 수 있는 필터를 장착하여 GFP 영상만 얻고 분석할 수 있습니다.
GFP의 영상에서 방해가 되었던 chlorophyll의 자가형광은 그 자체적으로 데이터가 되기도 합니다. Chlorophyll의 활성 정도를 자가형광을 통해서 확인할 수 있습니다.
또한 식물의 종자 및 callus에서도 영상을 얻을 수 있어 식물의 전체 생장 단계에서 기능을 확인할 수 있습니다.
DDS(Drug Delivery System)
형광을 drug이나 세포는 In Vitro 상에서 형광의 세기를 확인할 수 있습니다. 이러한 데이터는 예비실험 단계에서 형광의 표지 여부를 확인할 수 있습니다. 이는 본 실험의 결과를 예측 또는 수정하는 근거로 사용할 수 있습니다. 이러한 과정을 통해서 실험적 오류를 예방할 수 있습니다. 상황에 따라서는 In Vitro 실험 자체가 중요한 데이터가 될 수도 있습니다.
In Vitro로 확인된 drug은 실험목적에 맞게 실험동물에 주입할 수 있습니다. 이후, 일정시간 간격을 두고 영상을 얻음으로써, drug의 이동경로 및 축적 양상을 동물이 살아있는 상태에서 확인할 수 있습니다. 이를 통해서 drug의 targeting과 기능을 확인할 수 있습니다.
In Vivo로 확인된 drug의 영상은 Ex Vivo로 다시 확인할 수 있습니다. 형광은 동물이 희생된 후에도 지속적으로 발현하고 있기 때문에 각 조직만 분리하여 다시 한 번 형광영상을 얻고 정량 할 수 있습니다.
이렇게 얻어지는 Ex Vivo data는 In Vivo data와 함께 실험의 신뢰도를 높여 훌륭한 증거자료가 됩니다
Fig. 1. Animal imaging by FOBI
It is possible to apply most fluorescence proteins and fluorescence materials from GFP to ICG using four channels of Blue, Green, Red and NIR. Since more than one fluorescent substance can be imaged, different functions can be observed in one sample. For example, tumor imaging and drug imaging can be performed in the same animal, so targeting and tumorization can be observed simultaneously. You can also merge bright images in order to localization the fluorescence within the animal.
Fig. 2. Fluorescence imaging of various materials and methods
a. Fluorescence labeled chemicals in the Zebrafish. b. GFP cell in the 24well plate. c. Fluorescence labeling test. d. Ex Vivo imaging for drug delivery system. e. GFP expression leaf infected gene by virus vehicle. f. Auto-fluorescence from the chlorophyll. g. Gene expression on the leaf with marker gene. h. Gene transfected seed seperated by GFP imaging.